АНАЛИЗ УРОВНЯ ЭКСПРЕССИИ ГЕНА ЧЕЛОВЕКА TIM-1 МЕТОДОМ КОЛИЧЕСТВЕННОЙ ПЦР В РЕАЛЬНОМ ВРЕМЕНИ
Аннотация
Уровень экспрессии гена человека Т-клеточного-иммуноглобулинового-муцинового домена (TIM-1) является диагностически значимым при различных патологических состояниях организма. Целью настоящей работы была разработка ПЦР-системы для анализа уровня экспрессии гена TIM-1 с детекцией в режиме реального времени. Проведен дизайн праймеров и флуоресцентного зонда на консервативные участки гена TIM-1. Фрагмент гена был клонирован в плазмиду, которая в дальнейшем использовалась в качестве положительного контроля. Оптимизацию условий ПЦР проводили с использованием в качестве модели культуры клеток HEK293 (клетки почки эмбриона человека). Уровни экспрессии гена TIM-1 были определены в слюне десяти здоровых добровольцев, и они достоверно не отличались между собой. Разрабатываемая система может быть альтернативой закрытым коммерческим системам. В дальнейшем мы планируем проведение исследований экспрессии гена TIM-1 при различных патологиях.
Ключевые слова
Об авторах
Т. Ю. Бондаренко
ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор» Роспотребнадзора
Россия
Россия
к. б. н., научный сотрудник лаборатории молекулярной эпидемиологии ООИ, отдела молекулярной вирусологии флавивирусов и вирусных гепатитов,
р. п. Кольцово, Новосибирская область
В. А. Святченко
ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор» Роспотребнадзора
Россия
Россия
к. б. н., зав. лабораторией вирусологии флавивирусов,
р. п. Кольцово, Новосибирская область
В. А. Терновой
ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор» Роспотребнадзора
Россия
Россия
к. б. н., зав. лабораторией молекулярной эпидемиологии ООИ,
р. п. Кольцово, Новосибирская область
Список литературы
1. Freeman G. J., Casasnovas J. M., Umetsu D. T., De Kruyff R. H. TIM genes: a family of cell surface phosphatidylserine receptors that regulate innate and adaptive immunity. Immunol Rev. 2010 May; 235(1):172–89.
2. Feigelstock D., Thompsonv P., Mattoov P., Zhang Y., Kaplan G. G. The human homolog of HAVcr-1 codes for a hepatitis A virus cellular receptor. J Virol. 1998 Aug;72(8):6621–8
3. Chae S. C., Song J. H., Lee Y. C., Kim J. W., Chung H. T. The association of the exon 4 variations of Tim-1 gene with allergic diseases in a Korean population. Biochem Biophys Res Commun. 2003 Dec 12; 312(2):346–50.
4. Moresco R. N., Bochi G. V., Stein C. S., De Carvalho J. A. M., Cembranel B. M., Bollick Y. S. Urinary kidney injury molecule-1 in renal disease. Clin Chim Acta. 2018 Dec;487:15–21.
5. Bondarenko T. Y., Ternovoi V. A., Svyatchenko V. A., Kiselev N. N., Chausov E. V., Muntyanova M. U., Nemtsov Y. V., Yashin V. V., Kryuk N. I., Kuslii A. G., Nikulin L. G., Netesov S. V. Complete genomic sequence of rapidly replicating strain MB-7 of hepatitis a virus and its characterization in comparison with nucleotide sequence of other hepatitis a virus strain. Mol. Genet. Microbiol. Virol. 2010; 25: 39–46.
Для цитирования:
Бондаренко Т.Ю., Святченко В.А., Терновой В.А. АНАЛИЗ УРОВНЯ ЭКСПРЕССИИ ГЕНА ЧЕЛОВЕКА TIM-1 МЕТОДОМ КОЛИЧЕСТВЕННОЙ ПЦР В РЕАЛЬНОМ ВРЕМЕНИ. Российский иммунологический журнал. 2019;22(2-2):722-724. https://doi.org/10.31857/S102872210006750-0
For citation:
Bondarenko T.Yu., Svyatchenko V.A., Ternovoi V.A. ANALYSIS OF LEVEL EXPRESSION OF THE HUMAN GENE TIM-1 USING REAL-TIME QUANTITATIVE PCR. Russian Journal of Immunology. 2019;22(2-2):722-724. (In Russ.) https://doi.org/10.31857/S102872210006750-0
Просмотров: 57
Послать статью по эл. почте 