Preview

Российский иммунологический журнал

Расширенный поиск

Влияние бетаэндорфина и динорфина А на апоптоз лимфоцитов периферической крови человека in vitro

https://doi.org/10.46235/1028-7221-318-EOB

Полный текст:

Аннотация

Наряду с функционированием в ткани нервной системы эндогенные опиоидные пептиды – агонисты мю-, дельта- и каппа-опиоидных рецепторов – оказывают разнообразное регулирующее влияние на клетки иммунной системы. Кроме того, существуют экспериментальные доказательства того, что экзогенный агонист мю-опиоидных рецепторов – морфин – оказывает влияние на жизнеспособность клеток иммунной системы. Данные эффекты обнаружены в экспериментах как с клеточными культурами, так и на лабораторных животных. Поэтому мы исследовали влияние эндогенных опиатов – динорфина А и бета-эндорфина – на жизнеспособность мононуклеаров периферической крови человека. В наших экспериментах была использована периферическая венозная кровь 14 условно здоровых добровольцев, каждый из которых перед забором биоматериала подписывал информированное согласие и имел возможность задать все интересующие его вопросы. Мононуклеарные клетки получали из гепаринизированной венозной крови методом разделения на градиенте плотности по стандартной методике. Для оценки пролиферации мононуклеары культивировали во влажной атмосфере в течение 72 часов. За 18 часов до окончания культивирования в каждую лунку вносили по 2 мкКи 3H-метилтимидина. Радиоактивность проб определяли на жидкостном сцинтилляционном счетчике “Guardian” (Wallac, Финляндия) и выражали в имп/мин. Для оценки развития апоптоза клетки культивировали в течение суток в тех же условиях, за исключением добавления радиоактивной метки. Затем клетки окрашивали с помощью реагентов Annexin V-FITC/7-AAD kit (Beckman Coulter, США) согласно инструкции производителя и регистрировали апоптоз лимфоцитов методом проточной цитометрии. Исследование апоптоза клеток проводили на проточных цитофлюориметрах BD FACSCalibur (Becton Dickinson, США) или CytoFLEX S (Beckman Coulter, США). Гейт лимфоцитов (гейтировали по параметрам прямого и бокового светорассеяния) отображали на гистограмме Annexin V-FITC/7-AAD и подсчитывали долю (в процентах) живых клеток, связывающих аннексин (Annexin V-FITC+/7-AAD-). Статистическую обработку результатов проводили с использованием парного t-критерия Стьюдента. Было установлено, что агонисты мю- и каппа-опиоидных рецепторов бета-эндорфин и динорфин соответственно в физиологических концентрациях (10-10М и 10-8М) оказывают разнонаправленное влияние на пролиферацию мононуклеарных клеток периферической крови человека. Так, динорфин А стимулирует спонтанную пролиферацию и пролиферацию, вызванную субоптимальным воздействием митогена. Бета-эндорфин усиливает эффект субоптимальной концентрации митогена и значительно угнетает пролиферацию при максимальной активации клеток. Модулирующие эффекты бета-эндорфина и динорфина А in vitro на пролиферацию не связаны с усилением гибели клеток путем апоптоза.

Об авторах

С. В. Южанинова
ФГБУН «Институт экологии и генетики микроорганизмов» Уральского отделения Российской академии наук
Россия

Южанинова Светлана Вадимовна - к.м.н., научный сотрудник лаборатории биохимии развития микроорганизмов

614002, г. Пермь, ул. Ленина, 11

Teл.: 8 (902) 806-44-82

Факс: 8 (342) 280-92-11



С. Г. Гилёва
ФГБУН «Институт экологии и генетики микроорганизмов» Уральского отделения Российской академии наук
Россия

к.м.н., инженер лаборатории биохимии развития микроорганизмов

г. Пермь



Список литературы

1. Гейн С.В. Динорфины в регуляции функций иммунной системы // Биохимия, 2014. Т. 79, № 5. С. 509-519. [Gein S.V. Dynorphins in regulation of immune system functions. Biokhimiya = Biochemistry, 2014, Vol. 79, no. 5, pp. 509-519. (In Russ.)]

2. Гейн С.В., Баева Т.А. Эндогенные опиоидные пептиды в регуляции функций клеток врожденного иммунитета // Биохимия, 2011. Т. 76, №. 3. С. 379-390. [Gein S.V., Baeva T.A. Endogenous opioid peptides in regulation of innate immunity cell functions. Biokhimiya = Biochemistry, 2011, Vol. 76, no. 3, pp. 379-390. (In Russ.)]

3. Лимфоциты: методы / Под ред. Дж. Клауса; Пер. с англ. А.Н. Маца, А. А. Фельдшеровой. М.: Мир, 1990. 395 c. [Lymphocytes: Methods. Ed. by J. Klaus; Transl. from Engl. A.N. Matz, A.A. Feldsherova]. Moscow: Mir, 1990. 395 p.

4. Nair M.P., Schwartz S.A., Polasani R., Hou J., Sweet A., Chadha K.C. Immunoregulatory effects of morphine on human lymphocytes. Clin. Diagn. Lab. Immunol., 1997, Vol. 4, no. 2, pp. 127-132.

5. Singhal P.C., Kapasi A.A., Franki N., Reddy K. Morphine-induced macrophage apoptosis: the role of transforming growth factor-beta. Immunology, 2000, Vol. 100, no. 1, pp. 57-62.

6. Singhal P.C., Reddy K., Franki N., Sanwal V., Gibbons N. Morphine induces splenocyte apoptosis and enhanced mRNA expression of cathepsin-B. Inflammation, 1997, Vol. 21, no. 6, pp. 609-617.

7. Singhal P.C., Sharma P., Kapasi A.A., Reddy K., Franki N., Gibbons N. Morphine enhances macrophage apoptosis. J. Immunol., 1998, Vol. 160, no. 4, pp. 1886-1893.

8. Wang J., Charboneau R., Barke R.A., Loh H.H., Roy S. Mu-opioid receptor mediates chronic restraint stressinduced lymphocyte apoptosis. J. Immunol., 2002, Vol. 169, no. 7, pp. 3630-3636.

9. Yin D., Mufson R.A., Wang R., Shi Y. Fas-mediated cell death promoted by opioids. Nature, 1999, Vol. 397, no. 6716, 218. doi: 10.1038/16612.

10. Yin D., Woodruff M., Zhang Y., Whaley S., Miao J., Ferslew K., Zhao J., Stuart C. Morphine promotes Jurkat cell apoptosis through pro-apoptotic FADD/P53 and anti-apoptotic PI3K/Akt/NF-kappaB pathways. J. Neuroimmunol., 2006, Vol. 174, no. 1-2, pp. 101-107.


Для цитирования:


Южанинова С.В., Гилёва С.Г. Влияние бетаэндорфина и динорфина А на апоптоз лимфоцитов периферической крови человека in vitro. Российский иммунологический журнал. 2020;23(2):175-180. https://doi.org/10.46235/1028-7221-318-EOB

For citation:


Yuzhaninova S.V., Gileva S.G. Effects of beta-endorphin and dynorphin A on in vitro apoptosis in human peripheral blood lymphocytes. Russian Journal of Immunology. 2020;23(2):175-180. (In Russ.) https://doi.org/10.46235/1028-7221-318-EOB

Просмотров: 50


Creative Commons License
Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.


ISSN 1028-7221 (Print)