Preview

Российский иммунологический журнал

Расширенный поиск
Том 23, № 2 (2020)
Скачать выпуск PDF

КРАТКИЕ СООБЩЕНИЯ

115-118 2
Аннотация

Популяция CD4+Т-лимфоцитов является гетерогенной и объединяет клетки с различными функциями. На функциональную активность отдельных субпопуляций CD4+Т-лимфоцитов значительное влияние оказывает регуляция энергетического метаболизма клетки. В наивных CD4+Тлимфоцитах, CD4+Т-клетках центральной и эффекторной памяти, а также CD4+ терминальных эффекторах здоровых людей методом проточной цитофлуориметрии проведена оценка содержания транскрипционного коактиватора PGC-1α – регулятора окислительного фосфорилирования в клетке. Установлено, что PGC-1α экспрессируется во всех CD4+Т-лимфоцитах. Как среди конвенциональных, так и среди регуляторных клеток было обнаружено повышенное содержание PGC-1α в субпопуляциях CD4+Т-лимфоцитов центральной памяти, эффекторной памяти и терминальных эффекторах при их сравнении с наивными клетками. При этом содержание транскрипционного коактиватора в конвенциальных CD4+Т-клетках оказалось выше, чем в регуляторных CD4+Т-лимфоцитах. Полученные результаты свидетельствуют о том, что конвенциональные и регуляторные CD4+Т-клетки в разной степени зависят от присутствия транскрипционного коактиватора PGC-1α. По-видимому, PGC-1α является важным, но не единственным регулятором функционального состояния митохондрий регуляторных CD4+Т-лимфоцитов.

119-124 2
Аннотация

Опиоидные пептиды являются одной из наиболее изучаемых групп регуляторных пептидов, поскольку проявляют чрезвычайно широкий спектр биологической активности и играют важную роль в регуляции гомеостаза. Эндогенная опиоидная система участвует в функционировании целого ряда органов и систем, в том числе и иммунной системы. В настоящее время наиболее подробно описано иммуномодулирующее действие трех основных семейств опиоидных пептидов: эндорфинов, энкефалинов, динорфинов. Гораздо меньше информации об иммуномодулирующих эффектах эндоморфинов. Цель настоящей работы – оценка влияния эндоморфина-1 на фагоцитоз, продукцию активных форм кислорода и IL-1β различными фракциями клеток врожденного иммунитета периферической крови in vitro.
В качестве объекта исследования использовались лейкоциты периферической венозной крови здоровых доноров-добровольцев в возрасте от 22 до 40 лет. Эндоморфин-1 использовали в концентрациях 10-6, 10-8, 10-10, 10-12 М. Для получения фракции лейкоцитов гепаринизированную венозную кровь отстаивали в течение 2 ч в термостате при 37 °С. Выделение фракции нейтрофилов проводили на градиенте плотности фиколл-урографин (ρ = 1,077) путем наслаивания верхнего слоя плазмы крови с лейкоцитами. Оценку кислородзависимой микробицидной активности лейкоцитов осуществляли с использованием реакции люминолзависимой хемилюминесценции (ЛЗХЛ). В качестве индуктора использовали опсонизированный зимозан 150 мкг/мл, в качестве маркера выраженности реакции – люминол 10-5 М. Выделение фракции мононуклеарных клеток проводили на градиенте плотности фиколл-урографин (ρ = 1,077). Фракцию моноцитов выделяли механическим способом. Для оценки продукции IL-1β мононуклеары и моноциты культивировали в течение 24 ч, концентрацию цитокинов определяли методом твердофазного иммуноферментного анализа. Для оценки поглотительной активности моноцитов и нейтрофилов использовали метод, основанный на поглощении FITCмеченого St.aureus. Для статистической обработки использовали однофакторный дисперсионный анализ и парный LSD-критерий для post-hoc сравнения, различия считались значимыми при p < 0,05.
Установлено, что эндоморфин-1 снижал спонтанную продукцию активных форм кислорода и не влиял на стимулированную продукцию кислородных радикалов лейкоцитами. Во фракции нейтрофилов эндоморфин-1 не влиял на спонтанную кислородзависимую микробицидность и снижал интенсивность респираторного взрыва в стимулированных нейтрофилах. Пептид повышал процент фагоцитоза моноцитов и усиливал спонтанную продукцию IL-1β мононуклеарами. Таким образом, эндоморфин-1 оказывает разнонаправленное действие на различные показатели врожденного иммунитета. Как это свойственно и другим группам регуляторных пептидов, направленность эффектов эндоморфина зависела от состава клеточной фракции и присутствия стимулирующего сигнала.

125-132 2
Аннотация

На экспериментальной модели термического ожога кожных покровов у лабораторных животных показано иммунотропное действие на факторы клеточного и гуморального иммунитета нового гелевого метабиотика, представляющий собой комплекс биологических активных веществ, продуцируемых штаммом ВКПМ Bacillus subtilis B-3679 в составе трех гелевых транскутанных основ: тизоля, эфтидерма и кремнийтитанорганического глицерогидрогеля. Цель исследования – оценка иммунотропной активности нового гелевого метабиотика на факторы клеточного и гуморального иммунитета при экспериментальном моделировании термических ожогов кожи. Экспериментальное исследование проведено на 60 белых лабораторных крысах линии Wistar, массой 180-220 г. Объектом исследования был метабиотик, представляющий собой комплекс биологически активных веществ, продуцируемых штаммом ВКПМ Bacillus subtilis B-3679 в составе трех гелевых транскутанных основ: тизоля, эфтидерма и кремнийтитанорганического глицерогидрогеля (КТГГ). В качестве контроля использовали зарегистрированную, стандартизированную противомикробную и ранозаживляющую мазь левосин. Полученные экспериментальные данные подтверждают эффективность использования исследуемых препаратов для лечения термических ожогов первой и второй степени, что выражается более быстрым уменьшением площади пораженного участка, по сравнению с подопытными животными, леченными левосином. При оценке терапевтической эффективности экспериментальных образцов гелевых препаратов на основе метабиотика изучали их влияние на различные факторы клеточного и гуморального иммунитета на модели термического ожога кожи. Исследовали такие показатели, как фагоцитарная активность нейтрофилов крови и перитонеальных макрофагов, количественное содержание Т- и В-лимфоцитов, антителобразующих клеток и иммуноглобулинов различных классов. Было установлено, что у экспериментальных животных с воспроизведенными моделями травматических повреждений кожи наблюдается повышение уровня всех изучаемых показателей гуморального иммунитета. В большей степени возрастала концентрация иммуноглобулина М, цирку лирующих иммунных комплексов и иммуноглобулина Е, а также исследуемых цитокинов. Увеличивался уровень α-интерферона и рецепторного антагониста интерлейкина-1.
Таким образом, исследование гуморального статуса у подопытных животных, получавших испытуемые гелевые препараты на основе метабиотика при моделировании термических ожогов кожи, позволяет сделать заключение об их существенном влиянии на различные звенья как клеточного, так и гуморального иммунитета.
Более выраженные эффекты отмечены для препаратов на основе метабиотика, содержащих тизоль и КТГГ.
В целом, на основании полученных экспериментальных данных, можно сделать вывод о сравнительно высокой терапевтической эффективности исследуемых препаратов при лечении термических ожоговых ран кожных покровов у подопытных животных. Применение этих препаратов обеспечивало более раннее отторжение некротических масс, ускорение процессов регенерации, предупреждало развитие вторичной раневой инфекции при ожогах.

133-138 3
Аннотация

Механизм адипогенеза является сложным и многообразным, так как на него оказывают влияние многочисленные факторы, в том числе компоненты WNT-сигнального пути. Поиск возможных маркеров развития метаболических заболеваний, связанных с ожирением, обусловил интерес к изучению морфогенных белков склеростина и β-катенина. Целью исследования явилась оценка активности WNT-сигнального пути у пациентов с ожирением путем определения уровня белков склеростина и β-катенина в сыворотке крови.
В исследование были включены 32 пациента с метаболическим синдромом, имеющие прогрессирующие формы ожирения I-III степени при отсутствии сахарного диабета. Концентрацию склеростина и β-катенина в сыворотке крови определяли методом иммуноферментного анализа. Данные представлены в виде абсолютного и относительного (%) числа больных; среднего арифметического; медианы, 1-й и 3-й квартилей – Ме (Q0,25-Q0,75).
У пациентов, страдающих ожирением, в сыворотке крови выявлено повышение уровня склеростина (260 (230-308,75) пг/мл) на 13,5% по сравнению со здоровыми лицами (225 (220-230) пг/мл, (р < 0,001)); была отмечена тенденция к увеличению склеростина в зависимости от степени ожирения, чаще всего на фоне снижения β-катенина, что согласуется с данными литературы и может рассматриваться в качестве прогностического критерия течения патологического процесса при ожирении.

139-144 4
Аннотация

Существенным достоинством лекарственных препаратов растительного происхождения является их слабая токсичность для человека и совокупное действие комплекса биологически активных веществ, преимущественно полисахаридов, флавоноидов и терпеноидов. Один из механизмов влияния лекарственных растений на процессы иммунорегуляции реализуется через воздействие на продукцию определенного спектра цитокинов. В работе проведено исследование иммунорегуляторной активности водных извлечений из лекарственного растительного сырья (ЛРС), содержащего полифенольные соединения – флавоноиды (рутин, кверцетин, называемые P-витаминами). Целью исследования явилась оценка профиля и уровня цитокинов, секретируемых мононуклеарами периферической крови человека под влиянием водных извлечений ЛРС, содержащих флавоноиды. Использованы водные извлечения ЛРС (1:10) следующих видов: листья смородины черной (Ribes nigrum L.), трава хвоща полевого (Equisetum arvense L.), трава тысячелистника обыкновенного (Achillea millefolium L.), корни солодки (Glycyrrhiza uralensis Fisch.), цветки бессмертника песчаного (Helichrysum arenarium (L.) Moench), листья земляники лесной (Fragaria vesca L.), плоды черемухи обыкновенной (Padus avium Mill.), цветки пижмы обыкновенной (Tanacetum vulgare L.) и трава овса посевного (Avena sativa L.), приобретенных через аптечную сеть. Продукция про- (TNFα, IL-8, IL-1β) и противовоспалительного (IL-10) цитокинов исследовалась с помощью ИФА («Цитокин», Россия) в супернатанте культуры мононуклеаров в присутствии ЛРС (опыт) и без добавления настоев (контроль). Количественное определение суммы флавоноидов в цветках и листьях проводили на основе реакции комплексообразования с алюминия хлоридом на спектрофотометре UV-3600 (Shimadzu, Япония). Установлено преимущественно ингибирующее влияние водных извлечений из ЛРС на уровень секреции как про- (TNFα, IL-8, IL-1β), так и противовоспалительного (IL-10) цитокинов. Выраженность супрессивного эффекта влияния водных извлечений из лекарственных растений на секрецию цитокинов составляла от 51,5±3,4 до 99,5±4,1% в сравнении с контрольным значением (р < 0,05). Установлено наличие прямой связи суммарного содержания флавоноидов в изученных пробах ЛРС с выраженностью их иммунорегуляторной активности по влиянию на секрецию цитокинов: для TNFα (r = 0,65), IL-8 (r = 0,4), IL-1β (r = 0,48) и IL-10 (r = 0,68). Результаты настоящего исследования позволяют заключить, что извлечения из изученного лекарственного растительного сырья могут рассматриваться как перспективные компоненты на этапе разработки препаратов, обладающих иммунорегуляторным и антифлогогенным эффектами.

145-152 1
Аннотация

Макрофаги обнаруживаются во всех тканях и органах и обладают функциональной пластичностью, которая необходима для поддержания гомеостаза, регенерации тканей и иммунитета. Фенотип макрофагов определяется сигналами микроокружения. Традиционно выделяют классически (М1) или альтернативно (М2) активированные макрофаги. В патогенезе сахарного диабета (СД1) М1-макрофаги способствуют повреждению островков Лангерганса, потере β-клеток, вызывая аутофагию, которая может привести к развитию персистирующей инфекции. Развитие инфекции увеличивает риск смерти от гриппа или пневмонии у больных СД1. Поэтому представляется интересным изучение функционального ответа резидентных макрофагов органов и тканей, не являющихся мишенями при развитии сахарного диабета, а также их ответ на стимуляцию АДФН, который в ряде работ показывал модулирующее действие на иммунокомпетентные клетки.
В работе были исследованы морфологические и функциональные характеристики культуры макрофагов различной тканевой принадлежности, выделенные у интактных животных (ИЖ) и животных с моделью сахарного диабета 1 типа (СД1) в условиях стимуляции их веществом-модулятором макрофагов аминодигидрофталазиндионом натрия (АДФН) in vitro в условиях 24- и 72-часового культивирования. Исследование проводили на культурах макрофагов крысы, полученных из легких и селезенки. Определяли следующие морфометрические показатели: площадь клетки, цитоплазмы и ядер, а также ядерно-цитоплазматическое отношение (ЯЦО). Фенотип макрофагов определяли по оптической плотности экспрессии маркера CD163 (макрофагов типа М2) и CD80 (макрофаги М1). Функциональную активность макрофагов оценивали по уровню цитокинов IL-1α, IL-10 и TNFα в супернатантах культур. Воздействие АДФН на макрофаги животных с СД1 через 24 ч культивирования также приводило к изменению морфометрических параметров (уменьшению размеров ядра и клетки макрофагов селезенки, увеличению размеров ядра альвеолярных макрофагов, росту ЯЦО у макрофагов селезенки) и синтетической активности клеток (повышению уровня IL-1α и TNFα практически во всех популяциях клеток). Через 72 ч культивирования уровни секреции IL-1α и TNFα снижались у альвеолярных макрофагов, у макрофагов селезенки уровень секреции TNFα снижался, а IL-1α увеличивался. Экспрессия поверхностноклеточных маркеров М1- и М2-фенотипов также была подвержена действию АДФН. В особенности было отмечено увеличение экспрессии CD163 у стимулированных альвеолярных макрофагов, выделенных из животных с СД1.

153-156 1
Аннотация

В условиях воздействия ионизирующего излучения изучен антимутагенный эффект тритерпеноида милиацина для оценки его протекторных свойств при радиационной иммуносупрессии. Использованы мыши (CBAxC57Bl6)F1, разделенные на 4 группы: 1) интактные; 2) подвергнутые облучению; 3) подвернутые облучению после предварительного введения милиацина; 4) облученные после предварительного введения растворителя для милиацина. Облучение животных проведено на рентгеновской установке «РУСТ-М1» при дозе 4 Гр и экспозиции 288 с. Тест-системой служили миелокариоциты, анализ которых был проведен через 24 часа после облучения. Трехкратное предварительное введение милиацина в разовой дозе 4 мг/кг ослабляло мутагенный эффект облучения как по содержанию аберрантных клеток, так и по количеству аберраций на 100 метафазных пластинок. Вместе с тем эта протекция была существенно менее выраженной, чем при ранее установленной в условиях химического мутагенеза, что свидетельствует об ограниченных возможностях милиацина в защите центрального органа системы иммунитета – красного костного мозга при лучевом воздействии.

157-162 1
Аннотация

Миелоидные супрессорные клетки (MDSC) представляют собой гетерогенную популяцию незрелых миелоидных клеток, которые в норме дифференцируются в макрофаги, гранулоциты и дендритные клетки. Однако при патологических состояниях эти клетки приобретают супрессорный фенотип, подавляя иммунный ответ. Так, уровень MDSC возрастает при многих патологических состояниях, включая воспаление, сепсис, травматический шок, аутоиммунные заболевания, онкологический процесс, а также беременность. В последние 12 лет наблюдается устойчивый рост интереса к этой популяции клеток [PUBMED: 2008 (65 статей); 2020 (> 650 статей)]. Таким образом, изучение данной субпопуляции клеток, позволит расширить наши представления о функционировании иммунной системы. У человека MDSC характеризуются экспрессией маркеров HLA-DR-CD33+CD11b+, подразделяясь на гранулоцитарные (G-MDSC), моноцитарные (М-MDSC), а также ранние MDSC (e-MDSC) с фенотипом HLA-DR-CD11b+CD33+СD14-CD66b-. Целью данной работы являлась разработка адекватной экспериментальной модели, позволяющей оценивать дифференцировку MDSC человека из мононуклеарных клеток периферической крови при помощи цитокинов в условиях длительного культивирования in vitro. Объектами исследования были изолированные мононуклеарные клетки крови здоровых доноров, индуцированные в фенотип MDSC при помощи GM-CSF и IL-6 (40 или 20 нг/мл) в течение 7, 14, 21 суток. В ряде экспериментов за сутки до фенотипирования в культуры вносили липополисахарид (LPS) в концентрации 100 нг/мл. Процент живых Zombie Aqua-негативных клеток в культурах (внутри гейта клеток по FSC/SSC) колебался в пределах 90,5-93,9%. Существенных отличий между культурами выявлено не было. В наших экспериментальных условиях средний процент общей субпопуляции MDSC достигал 2-2,3% от общего количества живых клеток в культуре. Это в 9-10 раз больше процента данных клеток в свежевыделенных мононуклеарных клеток здоровых людей. По итогам проведенной экспериментальной работы мы установили, что для индукции e-MDSC из мононуклеарных клеток периферической крови человека необходимо 2 недели культивирования с 40 нг/мл IL-6 и 40 нг/мл GM-CSF. Для получения «зрелых» MDSC (M-MDSC + G-MDSC) оптимальными для нашей экспериментальной системы были следующие условия: 3 недели культивирования с 20 нг/мл IL-6 и 20 нг/мл GM-CSF с добавлением 100 нг/мл LPS за одни сутки до окончания культивирования. В целом дальнейшее изучение факторов, модулирующих дифференцировку MDSC, позволит выявить условия, необходимые для генерации этой популяции клеток-супрессоров, что имеет терапевтические перспективы.

163-168 1
Аннотация

В работе приведены результаты исследования супернатантов суточных бульонных культур Staphylococcus aureus, продуцирующих и не продуцирующих цитокиноподобные вещества, имеющих различия по наличию генов белка А стафилококка, по определению неспецифической активности при проведении иммуноферментного анализа с применением наборов АО «Вектор-Бест» (Новосибирск), а также тест-систем ООО «ХЕМА» (Москва) для диагностики некоторых инфекций и уровня содержания гормонов. Установлено, что в супернатантах штаммов Staphylococcus aureus, продуцирующих цитокиноподобные вещества, тождественные человеческим, иммуноферментным методом было достоверно определено отсутствие неспецифической перекрестной активности у всех тест-систем, кроме HBsAg. Это может свидетельствовать о высокой специфичности остальных изученных тестсистем и косвенно подтверждает предположение о том, что стафилококки способны секретировать белки, специфически реагирующие в основном с антителами против цитокинов человека, а также могут давать перекрестные реакции с другими антигенами, но не с антителами. Цитокиноподобная или неспецифическая активность не зависит от наличия или отсутствия белка А у изученных штаммов стафилококков.

169-174 1
Аннотация

Оценка цитокинового профиля, а именно определение содержания цитокинов в различных биологических жидкостях, имеет большое значение при иммунологической диагностике, изучении характеристик и состояния функциональной активности органов иммунной системы. При использовании иммуноферментного анализа (ИФА), как одного из наиболее распространенных методов диагностики, стоит учитывать характер биологического материала для исследования. В работе приведены результаты исследования супернатантов суточных бульонных культур Staphylococcus aureus, продуцирующих и не продуцирующих цитокиноподобные вещества, по определению неспецифической активности при проведении иммуноферментного анализа с применением наборов АО «Вектор-Бест» (г. Новосибирск), а также тест-системы ООО «ХЕМА» (Москва) для диагностики некоторых инфекций и содержания уровня гормонов. С учетом выше изложенного, наибольший интерес представляет выявление неспецифических реакций отдельных клинических изолятов S. aureus, проявляющих цитокиноподобную активность, при определении методом иммуноферментного анализа некоторых гормонов, антигенов и иммуноглобулинов к различным инфекциям, а также сравнение этих характеристик с параметрами интенсивности бактериальной цитокиноподобной продукции. Установлено, что в супернатантах некоторых штаммов Staphylococcus aureus, продуцирующих цитокиноподобные вещества, тождественные человеческим, иммуноферментным методом было достоверно установлено отсутствие неспецифической перекрестной активности, кроме тест системы на HBsAg, что может свидетельствовать о высокой специфичности остальных изученных тест-систем и косвенно подтверждает предположение о том, что стафилококки секретируют белки, специфически реагирующие в основном с антителами против цитокинов человека, но могут давать перекрестные реакции с другими антигенами, но не антителами.

175-180 1
Аннотация

Наряду с функционированием в ткани нервной системы эндогенные опиоидные пептиды – агонисты мю-, дельта- и каппа-опиоидных рецепторов – оказывают разнообразное регулирующее влияние на клетки иммунной системы. Кроме того, существуют экспериментальные доказательства того, что экзогенный агонист мю-опиоидных рецепторов – морфин – оказывает влияние на жизнеспособность клеток иммунной системы. Данные эффекты обнаружены в экспериментах как с клеточными культурами, так и на лабораторных животных. Поэтому мы исследовали влияние эндогенных опиатов – динорфина А и бета-эндорфина – на жизнеспособность мононуклеаров периферической крови человека. В наших экспериментах была использована периферическая венозная кровь 14 условно здоровых добровольцев, каждый из которых перед забором биоматериала подписывал информированное согласие и имел возможность задать все интересующие его вопросы. Мононуклеарные клетки получали из гепаринизированной венозной крови методом разделения на градиенте плотности по стандартной методике. Для оценки пролиферации мононуклеары культивировали во влажной атмосфере в течение 72 часов. За 18 часов до окончания культивирования в каждую лунку вносили по 2 мкКи 3H-метилтимидина. Радиоактивность проб определяли на жидкостном сцинтилляционном счетчике “Guardian” (Wallac, Финляндия) и выражали в имп/мин. Для оценки развития апоптоза клетки культивировали в течение суток в тех же условиях, за исключением добавления радиоактивной метки. Затем клетки окрашивали с помощью реагентов Annexin V-FITC/7-AAD kit (Beckman Coulter, США) согласно инструкции производителя и регистрировали апоптоз лимфоцитов методом проточной цитометрии. Исследование апоптоза клеток проводили на проточных цитофлюориметрах BD FACSCalibur (Becton Dickinson, США) или CytoFLEX S (Beckman Coulter, США). Гейт лимфоцитов (гейтировали по параметрам прямого и бокового светорассеяния) отображали на гистограмме Annexin V-FITC/7-AAD и подсчитывали долю (в процентах) живых клеток, связывающих аннексин (Annexin V-FITC+/7-AAD-). Статистическую обработку результатов проводили с использованием парного t-критерия Стьюдента. Было установлено, что агонисты мю- и каппа-опиоидных рецепторов бета-эндорфин и динорфин соответственно в физиологических концентрациях (10-10М и 10-8М) оказывают разнонаправленное влияние на пролиферацию мононуклеарных клеток периферической крови человека. Так, динорфин А стимулирует спонтанную пролиферацию и пролиферацию, вызванную субоптимальным воздействием митогена. Бета-эндорфин усиливает эффект субоптимальной концентрации митогена и значительно угнетает пролиферацию при максимальной активации клеток. Модулирующие эффекты бета-эндорфина и динорфина А in vitro на пролиферацию не связаны с усилением гибели клеток путем апоптоза.

181-186 1
Аннотация

Невынашивание беременности по определению ВОЗ (Всемирная Организация Здравоохранения) – это наличие в анамнезе у женщины 2 и более беременностей, закончившихся спонтанным выкидышем на сроках от зачатия до 22 недель беременности. Привычное невынашивание беременности (ПНБ) является одной из актуальных проблем бесплодных браков и составляет от 5 до 20% в структуре невынашивания беременности. 80% от всех идиопатических случаев ПНБ связано с иммунологическими нарушениями. В настоящее время, многие исследователи уделяют большое внимание изучению влияния Т- и В-клеток разного уровня дифференцировки в формировании иммунологического ответа на аллогенный трансплантат и формирование иммунологической толерантности. Однако интерес представляет тот факт, что гормон беременности ХГ (хорионический гонадотропин) обладает выраженным иммуносупрессивным действием, за счет регуляции функциональной активности Т-регуляторных лимфоцитов. Доказано, что ХГ способствует повышению Treg на периферии и привлечению этих клеток в зону имплантации эмбриона, формируя, таким образом, иммунологическую толерантность во время беременности. Однако нет данных о влиянии ХГ на Т и В-клетки разного уровня дифференцировки при ПНБ. Проведен корреляционный анализ между Т- и В-клетками разного уровня дифференцировки и уровнем ХГ у женщин с ПНБ. Установлена зависимость низкого уровня ХГ со снижением наивных Т- и В-клеток при одномоментном повышении эффекторных клеток памяти CD8+ (Tem), что может являться плохим прогностическим признаком особенно на ранних сроках беременности.

187-190 1
Аннотация

Регуляторный ревматоидный фактор (регРФ) представляет собой отдельную популяцию ревматоидного фактора, имеющую потенциал использования в клинической диагностике, а лимфоциты, его продуцирующие, – перспективная терапевтическая биомишень при аутоиммунных заболеваниях. Поэтому важно знать условия его надежного выявления у человека и лабораторных животных. Для выявления регуляторного ревматоидного фактора был использован метод агглютинации танизированных IgGнагруженных эритроцитов, так как данный метод выявляет только регуляторный ревматоидный фактор, в отличие от метода латекс фиксации, который выявляет и регуляторный ревматоидный фактор и классический ревматоидный фактор, ассоциированный с ревматическими заболеваниями. Обнаружено, что для определения уровня регРФ у крыс следует использовать свежую или замороженная сыворотку. В свежеполученной плазме крови крыс, стабилизированной гепарином, цитратом натрия или ЭДТА, регРФ не выявляется, что возможно связано с присутствием фибриногена, имеющего, как известно, сродство к IgG. Гепарин также самостоятельно затрудняет выявление регРФ у крыс. У человека регРФ надежно выявляется в плазме крови, стабилизированной цитратом натрия, предварительно замороженной. При использовании сыворотки крови для выявления регРФ у человека в небольшом количестве случаев были получены ложно-отрицательные результаты.

191-194 1
Аннотация

Во всем мире туберкулез продолжает оставаться одной из самых главных проблем здравоохранения. Согласно многочисленным литературным данным, это генетически детерминированное заболевание, и полиморфизм генов является механизмом, который приводит к прогрессированию от инфицирования к клинической манифестации. В настоящее время широко исследуется ассоциация туберкулеза с полиморфизмом гена IL6 в позиции -174, который отвечает за низкую продукцию цитокина. Ранее нами была оценена ассоциация аллелей и генотипов гена данного цитокина с предрасположенностью/устойчивостью к туберкулезу у русских Челябинской области. В данном исследовании мы провели сравнение распределения аллелей и генотипов гена IL6 у больных с разной степенью поражения легких: инфильтративной, очаговой и фиброзно-кавернозной формами туберкулеза. Были использованы следующие методы: выделение образцов ДНК из цельной крови, проведение генотипирования исследуемых полиморфизмов генов с помощью полимеразно-цепной реакции и электрофорез в агарозном геле. Мы установили, что для больных с очаговой формой характерна высокая частота встречаемости генотипа IL6(-174)*С/C, связанного с низкой продукцией цитокина, в то время как для больных с тяжелой фиброзно-кавернозной – генотипа IL6(-174)*G/C, отвечающего за средний уровень продукции.

195-202 1
Аннотация

Цель исследования – оценка патогенетической значимости мутаций гена TP53 у взрослых больных острыми миелоидными лейкозами (ОМЛ). Клиническое наблюдение проведено на 114 пациентах с ОМЛ на базе Свердловской областной клинической больницы № 1 (г. Екатеринбург), из них 56 – мужчины, 58 – женщины. Средний возраст обследованных составлял 53,3±2,8 лет.
Морфологически диагноз «ОМЛ» во всех случаях был предварительно верифицирован в специализированных лабораториях с использованием стандартных цитологических, цитохимических, иммунофенотипических, гистологических и иммуногистохимических методик. В исследование были включены следующие варианты ОМЛ: М0 – 5, М1 – 9, М2 – 47, М2базо – 3, М2эо – 2, М3 – 8, М4 – 25, М4эо – 3, М5 – 3, М6 – 4, М7 – 1, острый миелофиброз – 1, бластная плазмацитоидная дендритоклеточная опухоль – 2. Исследовали пробы периферической крови и аспиратов костного мозга пациентов. Все образцы протестированы на наличие молекулярных повреждений экзонов 4-11 гена ТР53. Кроме того, 81 проба, в том числе 22 – ОМЛ с нормальным кариотипом и 23 – с неуточненным, были обследованы на наличие мутаций гена NPM1 молекулярно-генетическим и иммуногистохимическим методами. Секвенирование кДНК осуществлялось на автоматическом генетическом анализаторе по прямой и обратной последовательностям. Обработка результатов секвенирования осуществлялась с использованием программы MEGA Х на основе статистической гипотезы, что они могут быть описаны биномиальным распределением. Проверка статистической гипотезы проведена с использованием точного критерия Фишера и χ2.
По результатам цитогенетического и ПЦР-исследований благоприятный прогноз определялся в 25 наблюдениях (21,9%), промежуточный – в 24 (21,1%), неблагоприятный – 33 случая (28,9%). В 32 пробах (28,1%) методами стандартной цитогенетики и ПЦР в реальном времени выявить генетические аномалии не удалось, соответственно, вариант прогноза у таких больных оказался не уточнен.
Миссенс-мутации ТР53 были представлены транзициями C292T, A377G, A659G, C817T (4 случая) и трансверсиями C569G, G733T, G841C (3 случая), также определялись синонимичные замены A639G (1,8%) и C891T (0,9%) по третьей позиции кодона, не имевшие патогенетического значения. В одной пробе (0,9%) определялась делеция тимидина в позиции 645 кодирующей последовательности, приводящая к синтезу укороченного мутантного белка. Все вышеуказанные мутации локализовались в области ДНК-связывающего домена. Также в одном наблюдении (0,9%) выявлена тандемная дупликация протяженностью 19 оснований в 960 позиции кодирующей последовательности NLS-домена белка, располагающаяся на сайте ацетилирования. Несинонимичная трансверсия C215G, являвшаяся полиморфным вариантом гена, определялась в 94 пробах (82,5%). Клинически все TP53-позитивные ОМЛ характеризовались неблагоприятным прогнозом и первичной резистентностью опухоли к стандартной полихимиотерапии. Средний возраст таких больных составил 63,0±5,4 лет, что достоверно выше, чем в среднем по выборке. Средняя длительность наблюдения равнялась 3,1±0,9 месяца.

203-208 1
Аннотация

Загрязнение окружающей среды ванадием экзогенного происхождения способствует его накоплению в биосредах человека и изменяет возможность организма адекватно отвечать на негативное воздействие экспозиции гаптенами. Целью работы явилось, используя метод проточной цитофлюориметрии, оценить иммунологическую реактивность у лиц с повышенным содержанием в крови ванадия (гаптена). Обследовано взрослое население с различным уровнем в крови ванадия. Группа наблюдения (n = 50) с уровнем контаминации ванадием статистически значимо (р < 0,001) в 3,7 раза превышавшей верхнюю границу референтного уровня и в 4,3 раза – среднегрупповое содержание ванадия у обследуемых группы сравнения в крови которых концентрация ванадия соответствовала диапазону референтных значений (n = 42). Установлено, что у лиц с избыточной контаминации крови ванадием отмечается интенсификация процессов активации лимфоцитов, повышение уровня эффекторных клеток с хелперной активностью, дефицит регуляторных лимфоцитов и гуморального звена иммунной системы, угнетение р53-зависимого контроля клеточного цикла. Таким образом, использование метода проточной цитометрии позволяет оценить иммунологическую реактивность у лиц с различным уровнем контаминации крови химическими веществами экзогенного происхождения, а также определить адаптационные возможности организма к воздействию химических факторов окружающей среды.

209-106 1
Аннотация

В последние десятилетия частота и распространенность аллергической патологии среди детского населения значительно увеличились. Цель исследования – изучить особенности специфической сенсибилизации к гаптенами и иммунный статус у школьников различных возрастных групп, в условиях высокой напряженности образовательного процесса. Перечень показателей специфической сенсибилизации к металлам и органическим соединениям изучен: у 67 детей первых классов и 35 детей 6-7 классов, обучающихся в школе с высокой напряженностью образовательного процесса и одновременно в условиях хронического воздействия экзогенных химических гаптенов (группа наблюдения № 1 и группа наблюдения № 2 соответственно); у 20 учеников начальных классов и 27 учеников 6-7 классов, обучающихся в условиях отсутствия избыточного воздействия негативных факторов (группа сравнения № 1 и группа сравнения № 2 соответственно). Определение иммуноглобулинов IgE специфического к марганцу, IgE специфического к никелю, IgE специфического к формальдегиду и IgG специфического к бензолу, IgG специфического к свинцу, IgG специфического к фенолу выполнено с использованием методологии аллергосорбентного тестирования; определение IL-4 (Th2) – методом иммуноферментного анализа; оценка уровня экспрессии CD19+ -рецептора на лимфоцитах – методом проточной цитометрии. В работе использовался простой линейный регрессионный анализ. Для проверки нулевых гипотез о равенстве средних значений между двумя независимыми группами с нормальным распределением применялся двухвыборочный критерий Стьюдента.
Установлено, у школьников, обучающихся в условиях хронического поступления экзогенных гаптенов, степень специфической сенсибилизации меняется с возрастом. У обучающихся старших классов относительно учеников начальных классов значительно возрастает уровень специфической сенсибилизации к органическим соединениям (уровень IgG к фенолу – в 1,5 раза) с одновременным существенным ростом экспрессии Th2 цитокинов (IL-4 – в 1,8 раза) и активацией гуморального звена иммунитета (повышение процентного содержания CD19+ лимфоцитов – в 1,3 раза). Установлена вероятностная причинно-следственная связь между содержанием в крови экзогенного гаптена фенола и повышением концентрации IgG специфического к фенолу (F = 140,81; R2 = 0,53; p < 0,001). Особенностями специфической сенсибилизации к гаптенам у обучающихся в динамике образовательного процесса является прогрессивный рост ее уровня, ассоциированный с возрастом обучающихся или временем гаптенной экспозиции.

217-224 1
Аннотация

Проведен ретроспективный анализ сенсибилизации, выявленной при проведении кожного тестирования у детей в возрасте 3-17 лет, обратившихся на прием к аллергологам в течение года. Достоверно чаще (р < 0,01) положительные результаты выявлялись при проведении исследований с бытовыми (70,2%), пищевыми (72,7%) и пыльцевыми аллергенами (67,9%) в сравнении с группой эпидермальных аллергенов (58,6%). В группе ингаляционных аллергенов чаще других выявлялась сенсибилизация к домашней (43,6%) и библиотечной пыли (25,7%), шерсти морской свинки (22,6%), шерсти кошки (21,8%), перхоти лошади (19,6%), шерсти овцы (16,8%), а также к пыльце деревьев (82,4%), луговых (64,0%) и сорных трав (64,1%).
В группе пищевых аллергенов при проведении кожных тестов наиболее часто выявлялась сенсибилизация к куриному яйцу, рыбе, молоку и куре. Среди пищевых злаков наиболее часто положительные реакции отмечались на пшеницу (9,9%) и ячменную крупу (9,1%) в сравнении с овсяной крупой (4,4%), ржаной мукой (5,0%) и гречей (5,6%).
При оценке результатов во всех группах аллергенов наиболее часто фиксировалась слабоположительная реакция с диаметром волдыря 2-3 мм. Частота выявления положительных результатов на все группы аллергенов значимо менялась в разные календарные месяцы и в зависимости от серии используемого аллергена. Выраженность волдырных реакций достоверно не различалась у детей с аллергическими заболеваниями и детей из группы риска по формированию аллергопатологии.

225-230 1
Аннотация

Радиационно-индуцированные изменения со стороны иммунной системы развиваются достаточно рано после начала радиационного воздействия и сохраняются спустя длительное время после прекращения облучения. При хроническом радиационном воздействии с мощностью дозы меньше 0,1 Гр/год порог годовой дозы облучения красного костного мозга для угнетения иммуногемопоэза составляет 0,3-0,5 Гр. Показано, что при хроническом действии ионизирующего излучения в кроветворной системе запускаются адаптационные механизмы. В данной работе количественно и качественно охарактеризованы взаимосвязи между отдельными звеньями врожденного и адаптивного иммунитета, что важно для понимания особенностей гомеостаза и адаптационных возможностей иммунной системы у хронически облученных лиц в отдаленные сроки. В основную группу было включено 376 жителей населенных пунктов, расположенных в бассейне реки Течи, загрязненной радиоактивными отходами в 1949-1960 гг. Средняя величина дозы облучения красного костного мозга у них составляла 1,08±0,04 Гр (диапазон доз был широким: 0,08-4,46 Гр), возраст варьировал в диапазоне от 58 до 88 лет (среднее значение – 70,3±0,3 года). Группа сравнения была представлена 162 необлученными людьми, возраст которых колебался в пределах от 58 до 90 лет (среднее значение – 69,3±0,5 лет). Методом корреляционного анализа по Кендаллу в основной группе выявлено 82 статистически значимые корреляции (коэффициент корреляции более 0,3, p – менее 0,05) между отдельными показателями иммунитета относительно 65 аналогичных корреляций в группе сравнения. Для большинства выявленных взаимосвязей в обеих группах коэффициент корреляции составил от 0,3 до 0,5 (57 связей – в основной группе, 41 – в группе сравнения), корреляций с коэффициентом от 0,5 до 0,7 насчитывалось 16 в основной группе и 14 – в группе сравнения, в то же время значение коэффициента корреляции свыше 0,7 было отмечено для 9 взаимосвязей в основной группе и для 10 – в группе сравнения. Анализ методом χ-квадрат не позволил отметить статистически значимых различий в общем количестве корреляций и количестве корреляций разной силы в сравниваемых группах. Полученные результаты согласуются с результатами ранее проведенных исследований и подтверждают, что изменения в иммунной системе у людей, подвергшихся хроническому низкоинтенсивному радиационному воздействию, в отдаленные сроки носят невыраженный характер и свидетельствуют о наличии у них компенсаторных механизмов регуляции по принципу прямой и обратной связи.

ЮБИЛЕЙ



Creative Commons License
Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.


ISSN 1028-7221 (Print)